High nitrous oxide (N2O) greenhouse gas reduction potential of Pseudomonas sp. YR02 under aerobic condition

假單胞菌YR02在好氧條件下的高N2O溫室氣體減排潛力

來源：Bioresource Technology 378 (2023) 128994

 

摘要核心內(nèi)容

 

本研究分離出一株新型好氧反硝化菌Pseudomonas sp. YR02，其在好氧條件下具備高效N?O還原能力。關鍵發(fā)現(xiàn)：

 

減排效能：在污水處理廠（WWTP）生物強化應用中，YR02菌株使N?O排放降低98.7%（圖6）。

 

生物動力學優(yōu)勢：YR02的N?O最大還原速率（V???,??? = 64.2 × 10?? μmol·cell?1·h?1）是其他N?O還原菌的3.6–128.4倍（表3）。

 

碳氮比優(yōu)化：N?O還原的最佳C/N=5，僅為無機氮（IN）去除所需C/N（15）的1/3（圖3b vs 圖4b）。

 

氮利用優(yōu)先級：修正Gompertz模型表明IN利用順序為TAN > NO?? > NO??（表2）。

 

工程應用：YR02生物強化提升污水處理廠32%的氮去除率（NRE），并顯著降低N?O排放。

 

研究目的

 

分離鑒定具有好氧N?O還原能力的菌株，解決污水處理中N?O排放問題。

解析菌株YR02的氮代謝路徑及環(huán)境因子（碳源、C/N、pH、DO）對其效能的影響。

通過生物動力學模型量化YR02的N?O還原潛力，驗證其工程應用價值。

 

研究思路

 

graph TD

A[菌株分離與鑒定] --> B[功能基因驗證]

B --> C[氮代謝性能評估]

C --> D[環(huán)境因子優(yōu)化]

D --> E[生物動力學參數(shù)測定]

E --> F[污水處理廠生物強化驗證]

 

關鍵實驗設計：

菌株來源：循環(huán)水產(chǎn)養(yǎng)殖系統(tǒng)廢水富集分離（16S rRNA鑒定為Pseudomonas屬，圖1）。

 

功能驗證：PCR確認含完整反硝化基因（napA, nirS, norB, nosZ），具備N?O→N?能力。

性能測試：在7種氮源組合下評估IN去除效率（圖2），氮平衡分析顯示氣態(tài)氮占比41.6–47.4%。

 

 

微呼吸儀系統(tǒng)：采用Unisense微呼吸儀實時監(jiān)測N?O濃度變化（3秒間隔），獲取動力學參數(shù)。

 

關鍵數(shù)據(jù)及意義

數(shù)據(jù)類別     來源圖表 研究意義

氮去除優(yōu)先級 圖2d-g, 表2  TAN優(yōu)先于NO??/NO??利用，指導工藝碳源投加策略

最佳C/N比     圖3b, 圖4b N?O還原最佳C/N=5（IN去除需C/N=15），降低運行成本

N?O還原動力學 圖5d, 表3 V???,???超常規(guī)菌株128倍，揭示高效減排機制

污水處理廠驗證 圖6   生物強化使N?O從22.5 μg·L?1降至0.3 μg·L?1，減排率98.7%

氮質(zhì)量平衡     圖2    氣態(tài)氮損失占比47.4%，證實N?O→N?轉(zhuǎn)化主導

 

 

 

核心結(jié)論

 

高效N?O還原：YR02的N?O親和力（a??? = 2.40 × 10?? L·cell?1·h?1）和V???,???顯著優(yōu)于傳統(tǒng)反硝化菌，適合處理中濃度N?O廢水。

環(huán)境適應性：最佳N?O還原條件為pH 8.0、檸檬酸鹽為碳源、C/N=5，與污水處理廠常見條件兼容。

工程價值：生物強化不僅減排N?O，還提升系統(tǒng)脫氮效率32%，證實其“脫氮-減排”雙效功能。

代謝機制：氮平衡分析表明52.6–58.4%氮用于同化，41.6–47.4%轉(zhuǎn)化為氣態(tài)氮（含N?O→N?）。

 

Unisense電極數(shù)據(jù)的深度解讀

技術(shù)原理

 

傳感器類型：Unisense N?O微電極（微呼吸儀系統(tǒng)）

檢測原理：安培法實時監(jiān)測溶解態(tài)N?O濃度（0–300 μmol·L?1）

校準方法：飽和N?O溶液（100%） vs. N?飽和溶液（0%）

 

關鍵發(fā)現(xiàn)與意義

 

N?O還原動力學（圖5d, 表3）：

高V???,???：64.2 × 10?? μmol·cell?1·h?1，為迄今報道最高值，揭示YR02的酶催化效率優(yōu)勢。

Km,??? = 26.7 μmol·L?1：高于低親和力菌（如Azospira spp.），但低于高親和力菌（如Dechloromonas），表明適合處理中濃度N?O（典型WWTP中<20 μmol·L?1）。

意義：量化菌株對N?O的親和力與耐受性，為生物強化菌株篩選提供關鍵參數(shù)。

 

碳源影響機制（圖4a, 表3）：

檸檬酸鹽為碳源時V???,???最高（27.1 × 10?? μmol·cell?1·h?1），因直接進入TCA循環(huán)供能。

意義：指導污水處理廠碳源優(yōu)化，降低N?O還原的有機碳需求。

 

實時過程監(jiān)控（補充材料）：

秒級分辨率捕捉N?O濃度動態(tài)變化，證實好氧條件下N?O還原無滯后現(xiàn)象。

意義：推翻“好氧環(huán)境抑制N?O還原”的傳統(tǒng)認知，為好氧區(qū)減排提供依據(jù)。

 

技術(shù)價值總結(jié)

 

機制解析：實時量化N?O代謝動力學，揭示YR02在好氧條件下的獨特還原能力。

工藝優(yōu)化：精準識別最佳C/N（5）和pH（8.0），避免傳統(tǒng)批量實驗的誤差累積。

應用拓展：該技術(shù)適用于其他氣體代謝研究（如CH?、H?S），推動廢水處理低碳化。

 

注：Unisense微呼吸儀在本研究中的不可替代性在于其高時間分辨率（3秒）與無損監(jiān)測能力，為好氧反硝化菌的N?O代謝機制研究提供了直接證據(jù)。