SIRT6 enhances oxidative phosphorylation in breast cancer and promotes mammary tumorigenesis in mice

SIRT6 增強(qiáng)乳腺癌的氧化磷酸化并促進(jìn)小鼠乳腺腫瘤的發(fā)生

來源：Becherini et al. Cancer & Metabolism (2021) 9:6

 

1. 摘要核心內(nèi)容

 

本研究揭示SIRT6通過激活線粒體氧化磷酸化（OXPHOS）驅(qū)動乳腺癌進(jìn)展。核心發(fā)現(xiàn)：

 

動物模型：Sirt6雜合缺失（Sirt6?/?）顯著延長MMTV-PyMT小鼠乳腺腫瘤潛伏期并提高生存率（圖1b）；

 

細(xì)胞功能：SIRT6沉默抑制MDA-MB-231異種移植瘤生長（圖2b-c）；

 

代謝機(jī)制：SIRT6通過其脫乙酰酶活性增強(qiáng)丙酮酸脫氫酶（PDH）表達(dá)與活性（圖3a-d）、呼吸鏈復(fù)合物活性（圖3e-h）及ATP/AMP比值（圖4a-g），并降低AMPK活化（圖4o）；

 

 

 

關(guān)鍵證據(jù)：丹麥Unisense電極實(shí)時監(jiān)測顯示SIRT6過表達(dá)使細(xì)胞耗氧率↑2倍（圖3f），直接證實(shí)OXPHOS增強(qiáng)。

 

2. 研究目的

 

明確SIRT6在乳腺癌發(fā)生中的作用；

 

解析SIRT6調(diào)控腫瘤代謝的分子機(jī)制（尤其OXPHOS）；

 

評估靶向SIRT6的治療潛力。

 

3. 研究思路

 

動物→細(xì)胞→分子三層次驗(yàn)證：

 

動物模型：

 

構(gòu)建MMTV-PyMT?/?; Sirt6?/?小鼠，比較腫瘤潛伏期/生存率（圖1b）；

 

分析腫瘤組織呼吸鏈復(fù)合物活性及ATP/AMP比值（圖5a-d）。

 

細(xì)胞功能：

 

MDA-MB-231異種移植：SIRT6沉默抑制腫瘤生長（圖2b-c）；

 

過表達(dá)/沉默SIRT6：檢測PDH活性、呼吸鏈復(fù)合物活性、ATP合成（圖3-4）；

 

丹麥Unisense電極實(shí)時監(jiān)測細(xì)胞耗氧率（圖3f）。

 

分子機(jī)制：

 

WT vs. 催化失活突變體（H133Y）SIRT6：驗(yàn)證酶活性依賴性（圖3a-h）；

 

qPCR/WB：檢測OXPHOS相關(guān)基因（UQCRFS1、COX5B等）表達(dá)。

 

4. 關(guān)鍵數(shù)據(jù)及研究意義

（1）SIRT6促進(jìn)腫瘤發(fā)生（圖1-2）

 

數(shù)據(jù)：

 

Sirt6?/?使MMTV-PyMT小鼠腫瘤潛伏期↑40%，生存率↑35%（圖1b）；

 

SIRT6沉默使MDA-MB-231移植瘤體積↓50%（圖2b-c）。

 

意義：首次證實(shí)SIRT6是乳腺癌進(jìn)展的關(guān)鍵驅(qū)動因子，為靶向治療提供依據(jù)。

 

（2）SIRT6激活OXPHOS（圖3-5）

 

數(shù)據(jù)：

 

PDH調(diào)控：SIRT6過表達(dá)使PDH活性↑2倍（圖3d）；

 

呼吸鏈活性：復(fù)合物I/III/IV活性↑1.5-2倍（圖3e-g）；

 

能量狀態(tài)：ATP/AMP比值↑3倍（圖4g）；

 

耗氧率：SIRT6過表達(dá)細(xì)胞基礎(chǔ)耗氧率↑2倍（Unisense電極，圖3f）。

 

意義：揭示SIRT6通過增強(qiáng)OXPHOS維持腫瘤能量穩(wěn)態(tài)，挑戰(zhàn)“Warburg效應(yīng)”主導(dǎo)觀點(diǎn)。

 

（3）SIRT6抑制AMPK活化（圖4o）

 

數(shù)據(jù)：SIRT6沉默使AMPK磷酸化（Thr172）↑2倍。

 

意義：低ATP/AMP比值激活A(yù)MPK，可能觸發(fā)腫瘤抑制性代謝重編程。

 

5. 核心結(jié)論

 

SIRT6是乳腺癌促癌因子：高表達(dá)與不良預(yù)后相關(guān)，沉默可抑制腫瘤生長；

 

代謝調(diào)控核心機(jī)制：SIRT6通過脫乙酰酶活性增強(qiáng)PDH活性及呼吸鏈功能，提升OXPHOS效率；

 

能量感知樞紐：SIRT6維持高ATP/AMP比值，抑制AMPK腫瘤抑制通路；

 

治療靶點(diǎn)潛力：靶向SIRT6-OXPHOS軸有望成為乳腺癌新策略。

 

6. 丹麥Unisense電極的研究意義

 

技術(shù)原理與數(shù)據(jù)：

 

功能：采用Unisense氧敏感微電極（方法部分）實(shí)時監(jiān)測封閉腔室內(nèi)細(xì)胞耗氧動力學(xué)：

 

動態(tài)監(jiān)測：37℃下記錄2×10?個細(xì)胞在10分鐘內(nèi)的溶解氧濃度變化；

 

關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)：

 

比較空載體 vs. SIRT6過表達(dá)細(xì)胞的基礎(chǔ)耗氧率；

 

添加底物（丙酮酸/蘋果酸）激活復(fù)合物I-III-IV通路后的最大耗氧率（圖3f）。

 

關(guān)鍵參數(shù)：

 

SIRT6過表達(dá)使基礎(chǔ)耗氧率↑2倍；

 

底物刺激后耗氧率進(jìn)一步↑40%（證實(shí)呼吸鏈功能增強(qiáng)）。

 

科學(xué)價值：

 

精準(zhǔn)量化OXPHOS功能：

 

直接證實(shí)SIRT6提升線粒體呼吸容量（非僅間接代謝物檢測）；

 

揭示SIRT6對呼吸鏈的功能性調(diào)控（補(bǔ)充WB/qPCR的分子表達(dá)數(shù)據(jù)）。

 

技術(shù)不可替代性：

 

生理相關(guān)性：活細(xì)胞實(shí)時監(jiān)測，避免離體線粒體提取導(dǎo)致的活性失真；

 

動態(tài)分辨率：秒級記錄捕捉呼吸響應(yīng)動力學(xué)，發(fā)現(xiàn)SIRT6過表達(dá)細(xì)胞對底物刺激反應(yīng)更敏捷。

 

機(jī)制深度解析：

 

結(jié)合ATP合成數(shù)據(jù)（圖4a），明確SIRT6通過增強(qiáng)電子傳遞鏈效率提升能量產(chǎn)出；

 

為“SIRT6-OXPHOS軸驅(qū)動乳腺癌”假說提供直接生理功能證據(jù)。

 

領(lǐng)域貢獻(xiàn)：

 

首次將Unisense電極技術(shù)應(yīng)用于SIRT6代謝研究，確立其為腫瘤線粒體功能研究的金標(biāo)準(zhǔn)；

 

揭示即便在“糖酵解依賴型”MDA-MB-231細(xì)胞中，OXPHOS仍是SIRT6的核心效應(yīng)，顛覆傳統(tǒng)腫瘤代謝認(rèn)知。

 

創(chuàng)新點(diǎn)圖示：

 

SIRT6脫乙酰酶活性 → PDH表達(dá)/活性↑ → 乙酰-CoA生成↑ →  

│ → 呼吸鏈復(fù)合物活性↑ → 耗氧率↑ → ATP合成↑ → AMPK抑制  

└ → 鈣信號↑ → 協(xié)同激活PDH

 

臨床啟示：

 

診斷價值：腫瘤組織耗氧率或成SIRT6活性新型生物標(biāo)志物；

 

治療策略：SIRT6抑制劑（如小分子拮抗劑）可能通過抑制OXPHOS發(fā)揮抗癌作用。