Rice leaf hydrophobicity and gas films are conferred by a wax synthesis gene(LGF1) and contribute to flood tolerance

水稻葉片疏水性和氣膜由蠟合成基因(LGF1)賦予并有助于耐淹性

來源:New Phytologist, Volume 218, 2018, Pages 1558-1569

《新植物學家》,第218卷,2018年,第1558-1569頁

 

摘要

摘要指出,洪水會阻礙植物與環境的氣體交換,而水稻葉片疏水性可以保留氣膜,但這一性狀的遺傳調控未知。研究使用drp7突變體(不能保留氣膜)和野生型Kinmaze,通過基因發現和互補測試,鑒定出Leaf Gas Film 1 (LGF1)基因。LGF1調控C30初級醇合成,影響表皮蠟質血小板豐度、葉片疏水性和氣膜保留,從而增強水下光合作用(8.2倍)和耐淹性。基因功能通過互補實驗驗證。

 

研究目的

鑒定控制水稻葉片氣膜保留的基因,并闡明其分子遺傳機制和生理功能,特別是對水下光合作用和耐淹性的貢獻,以幫助提高洪水易發區水稻產量的穩定性。

 

研究思路

基于使用drp7突變體(葉片親水,不能保留氣膜)和野生型Kinmaze(疏水,保留氣膜)進行對比。通過基因定位(利用F2群體進行位置克隆)識別候選基因LGF1,然后進行基因表達分析、互補測試(在drp7背景中表達LGF1 cDNA),并評估轉基因植株的葉片性狀(如蠟質成分、疏水性、氣膜保留和水下光合作用),以驗證基因功能。

 

測量的數據及研究意義

1 葉片疏水性(通過接觸角測量):數據來自圖1c-f。研究意義是量化葉片疏水程度,接觸角大于90度表示疏水,大于150度表示超疏水,直接關聯氣膜保留能力;結果顯示drp7突變體疏水性喪失,而Kinmaze保持,證實疏水性是氣膜保留的基礎。

 

2 氣膜厚度(通過浮力法測量):數據來自圖2a。研究意義是直接評估氣膜在淹沒條件下的持久性;結果顯示drp7突變體氣膜很快消失,而Kinmaze保持,表明氣膜保留是水下氣體交換的關鍵因素。

 

3 水下凈光合作用(通過測量O2 evolution,使用丹麥Unisense電極):數據來自圖2b,c。研究意義是評估淹沒條件下光合效率;結果顯示drp7突變體水下光合作用顯著降低,而Kinmaze保持較高速率,證明氣膜通過降低CO2擴散阻力(8.2倍)增強水下光合作用,這對耐淹性至關重要。

4 葉片表面結構(通過掃描電子顯微鏡觀察):數據來自圖1g,h和圖4g,h。研究意義是分析表皮蠟質血小板和乳突密度;結果顯示drp7突變體蠟質血小板減少,而Kinmaze豐富,表明LGF1通過調控蠟質影響疏水性。

 

5 蠟質成分(通過GC-MS和GC-FID分析):數據來自圖6a,b。研究意義是確定LGF1對蠟質生物合成的影響;結果顯示drp7突變體C30初級醇減少、C30醛增加,而互補株恢復,表明LGF1調控C30初級醇合成,從而影響蠟質形成和疏水性。

 

6 基因表達(通過實時定量PCR):數據來自圖3f。研究意義是評估LGF1轉錄水平;結果顯示drp7突變體表達量低,而Kinmaze在擴展葉片中高表達,證實LGF1在蠟質合成中的關鍵作用。

 

7 其他性狀(如田間耐淹性、缺水響應和病害敏感性)。研究意義是擴展LGF1的多效性;結果顯示drp7突變體在淹水田間死亡、缺水時失水更快、更易感稻瘟病,表明LGF1不僅影響耐淹性,還涉及水分保持和抗病性。

 

結論

LGF1/OsHSD1基因通過調控C30初級醇合成,影響表皮蠟質血小板豐度,從而賦予葉片疏水性和氣膜保留能力;這一性狀顯著增強水下光合作用(CO2進入效率提高8.2倍)并貢獻于水稻耐淹性。基因功能通過互補實驗驗證,為育種改善洪水易發區水稻產量穩定性提供了新靶點。

 

使用丹麥Unisense電極測量數據的研究意義

使用丹麥Unisense電極(型號OX-500)測量溶解氧濃度,用于評估水下凈光合作用。具體方法是將葉片段置于封閉瓶中,在光照下測量O2 evolution,從而計算光合速率。研究意義在于,該電極提供高精度和實時O2測量,能夠準確量化淹沒條件下葉片的氣體交換效率。數據表明,氣膜存在時(如Kinmaze),O2 evolution速率高,證明氣膜降低CO2擴散阻力,促進水下光合作用;而無氣膜時(如drp7),O2 evolution低,顯示氣體交換受阻。這直接驗證了氣膜在增強耐淹性中的生理機制,為理解植物適應洪水提供了關鍵實驗證據。